Ovaj članak ili neki od njegovih odlomaka nije dovoljno potkrijepljen izvorima (literatura, veb-sajtovi ili drugi izvori). Ako se pravilno ne potkrijepe pouzdanim izvorima, sporne rečenice i navodi mogli bi biti izbrisani. Pomozite Wikipediji tako što ćete navesti validne izvore putem referenci te nakon toga možete ukloniti ovaj šablon.
Ackles vjerovatno je najpoznatiji po svojoj ulozi Erica Bradya NBC-ove sapunice Naši najbolji dani od 1997 do 2000. godine. Uloga mladog fotografa donijela mu je, 1998. godine, nagradu za najboljeg muškog pridošlicu u seriji.Nakon što je napustio seriju Naši najbolji dani, Ackles se preselio u Vancouver, te se pridružio glumačkoj ekipi serije Anđeo tame, u kojoj je glumio lik po imenu Alec. Radio je na toj seriji, ubijeđen od strane Jamesa Camerona i glavne glumice, Jessicae Albe, od 2001 do 2002. godine. 2003. godine, nekoliko se puta pojavio, kao C.J., u hit seriji televizijske mreže WB, Dawson's creek.
2004. godine, Ackles vratio se u Vancouver, gdje je dobio jednu od glavnih uloga u široko poznatoj seriji WB-a, Smallville, koja govori o Clarku Kentu u vremenu, kada je bio tinejdžer. Njegov lik, Jason Teague, izlazi sa Clarkovom bivšom djevojkom, Lanom Lang, koju glumi Kristin Kreuk.
Ackles vratit će se na televizijske ekrane u novoj WB-ovoj naučno-fantastičnoj seriji Lovci na natprirodno, u ulozi Deana Winchestera.